概述:
凝集素(Lectin)是一類廣泛存在的蛋白質,能夠特異性識別糖結構,糖蛋白和糖脂在細胞中廣泛存在。糖基化修飾在細胞的分化,病原與宿主之間的相互作用以及腫瘤的發生、發展和遷移上扮演著重要角色。凝集素是天然存在的,是用于細胞表面糖基化及蛋白質糖基化分析的極佳工具。
凝集素結合的糖及種類分布
芯片應用:
活細胞表面糖譜變化和差異的檢測
活細胞表面相關糖生物標識物的發現
臨床標本的糖基化生物標志物分析
目標蛋白質的糖基化分析
芯片特點:
- 芯片有91種凝集素,覆蓋幾乎所有可商業獲得的來源
- 每張芯片分12個Sub-Array ,同時進行12個樣品平行檢測
- 每種凝集素在每個點陣種重復兩點
- 芯片的制備和保存均在低溫下進行,充分保證蛋白活性
應用案例:
High-Throughput Lectin Microarray-Based Analysis of Live Cell Surface Glycosylation
Current Protocols in Protein Science . 12.9.1-12.9.7, February 2011
Yu Li1, Sheng-ce Tao2,3,4, Heng Zhu2,3, and Jonathan P. Schneck1
傳統用于檢測糖基化的方法是流式細胞儀、蛋白免疫印跡、組織化學和質譜等方法。這些方法既不能顯示糖基化的特異性,也不能保證高通量分析。而凝集素芯片的出現解決了這兩方面困難,同時也顯現出了在早期研究細胞裂解物、細菌等糖基化類型方面的應用前景。
Yu Li等2011年2月,在Schott NexterionR H slides(薄膜圖層芯片)上點制110種凝集素(每種樣品重復3個點),制備好的凝集素芯片置于4°C下避光保存,備用。然后檢測了HEK293活細胞(人胚腎細胞)的表面糖基化情況。
參考文獻:
1.Zhou SM, et al. Lectin microarray: A powerful tool for glycan related biomarker discovery. Comb Chem High Throughput Screen.2011 ;14:711-9
2.Li Y, Tao SC ,et al. High-throughput lectin microarray-based analysis of live cell surface glycosylation. Curr Protoc Protein Sci. 2011;Chapter 12:Unit12.9
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