原理:
免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質印跡(Western
blotting),是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡具有
SDS-PAGE
的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現已成為蛋白分析的一種常規技術。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分析。結合化學發光檢測,可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。
實驗流程:
1、細胞及組織蛋白質抽提;
2、蛋白質定量;
3、變性聚丙烯酰胺不連續凝膠電泳(SDS-PAGE);
4、蛋白質轉膜;
5、膜的封閉;
6、一抗、二抗孵育;
7、結果檢測:化學發光法檢測,X 膠片曝光顯影;
8、數據分析。
服務要求:
1、客戶需自備一抗,或由本公司代購;
2、標本盡可能新鮮;標本量:組織塊大于100mg;細胞數大于5×106;
3、技術部將在收到標本后15-20個工作日之內提交實驗結果,實驗結果以數據和圖片的形式提交給客戶。
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